李斯特氏菌顯色培養基操作步驟
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產品名稱：李斯特氏菌顯色培養基
規格：BR10ml
包裝：20支/盒
用途：用于李斯特氏菌的顯色培養，單增李斯特氏菌顯藍色，外圍有一不透明環
溫馨提示：僅供科研實驗，不得用于其它用途！歡迎來電咨詢。
配方：（g/L）
營養物質 70.0
顯色劑 1.0
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃
李斯特氏菌添加劑 6.0g
稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌；另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑，加入 20ml 無菌水，并加入一些玻璃球，不停振動，使其乳化均勻，將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時，把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中，并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支，混勻，傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 5mm ，這樣有利觀察不透明環。
貯存：制備好的固體平板保存于 2-8 ℃，應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃
失效：干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟：
使用前，把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。
1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液；
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養 48 小時；或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 ： 10 的比例混勻， 30 ℃培養 24 小時。
3 、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上， 37 ℃培養 24-48 小時。
質量控制：
1 、外觀：此干燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。
2 、微生物試驗：在 37 ℃培養 24-48 小時
典型特征：
單增李斯特氏菌 37 ℃培養 24-28 小時， 平板上出現藍色菌落，菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養 48 小時 ，平板上出現藍色菌落，菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養 24-48 小時， 平板上出現藍色菌落，菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
培養基pH 的初步調整：
培養基各成分完全溶解后，應進行pH 的初步調正，因培養基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的終pH ，保證培養基的質量。pH 調正后，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉淀物的析出。
培養基的分類：
（1）合成培養基。合成培養基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚，組成成分，重復性強，但價格較貴，而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏（Czapek）培養基等。
（2）天然培養基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養霉菌，后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養豐富，所以常被采用。
（3）半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分，如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。
產品名稱：李斯特氏菌顯色培養基
規格：BR10ml
包裝：20支/盒
用途：用于李斯特氏菌的顯色培養，單增李斯特氏菌顯藍色，外圍有一不透明環
溫馨提示：僅供科研實驗，不得用于其它用途！歡迎來電咨詢。
配方：（g/L）
營養物質 70.0
顯色劑 1.0
pH 7.2 ± 0.2 25 ℃
李斯特氏菌添加劑 6.0g
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得佳的結果。
稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水，加熱溶解并不停攪拌；另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑，加入 20ml 無菌水，并加入一些玻璃球，不停振動，使其乳化均勻，將二者分別于 121 ℃高壓滅菌 15 min 。冷至 50 ℃左右時，把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中，并加入李斯特氏菌抑菌劑 1 和 2 各 1 支，混勻，傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 5mm ，這樣有利觀察不透明環。
貯存：制備好的固體平板保存于 2-8 ℃，應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處， 保存溫度 2-8 ℃
失效：干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
操作步驟：
使用前，把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。
1 、按 SN 標準、 GB 標準、 FDA 標準、 ISO 標準或其它標準制備樣品液；
2 、把 25g 樣品液加入 225mlEB 增菌液中 30 ℃培養 48 小時；或把樣品液和 Half-Fraser 增菌液按照 1 ： 10 的比例混勻， 30 ℃培養 24 小時。
3 、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上， 37 ℃培養 24-48 小時。
質量控制：
1 、外觀：此干燥培養基的粉末均勻，具有良好的流動性，呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。
2 、微生物試驗：在 37 ℃培養 24-48 小時
典型特征：
單增李斯特氏菌 37 ℃培養 24-28 小時， 平板上出現藍色菌落，菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 37 ℃培養 48 小時 ，平板上出現藍色菌落，菌落周圍有一不透明環。西爾李斯特氏菌 37 ℃培養 24-48 小時， 平板上出現藍色菌落，菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
培養基pH 的初步調整：
培養基各成分完全溶解后，應進行pH 的初步調正，因培養基在加熱消毒過程中、pH 會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH 卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養基的終pH ，保證培養基的質量。pH 調正后，還應將培養基煮沸數分鐘，以利培養基沉淀物的析出。
培養基的分類：
（1）合成培養基。合成培養基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養基的化學成分清楚，組成成分，重復性強，但價格較貴，而且微生物在這類培養基中生長較慢。如高氏一號合成培養基、察氏（Czapek）培養基等。
（2）天然培養基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養霉菌，后者用于培養細菌。這類培養基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養豐富，所以常被采用。
（3）半合成培養基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養基的基礎上添加某些天然成分，如培養霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基。這類培養基能更有效地滿足微生物對營養物質的需要。
