天天色播-欧美综合一区-特黄三级又爽又粗又大-久久a级片-人人干av-av在线日韩-欧美在线不卡视频-人体av-欧美在线二区-免费高清毛片-丰满少妇高潮在线观看-奇米第四色7777-国产肉体ⅹxxx137大胆-男女视频国产-制服 丝袜 激情 欧洲 亚洲-天天操天天舔天天干-中国精品毛片-免费看黄色一级大片-成人涩涩网站-成人试看120秒体验区-亚洲区第一页-生活片av-国产一区99-樱桃国产成人精品视频-国产自在自拍

主營產品: 科研人類ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒代測,小鼠ELISA試劑盒廠家
產品分類

公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

公司地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號

郵政編碼:

公司電話:18321664727

公司傳真:

電子郵件:272967093@qq.com

聯(lián) 系 人:洛辰 ( 女士 )

部門(職位):

手機號碼:13621980056

即時通訊:        

技術文章

樊克生物:質粒載體的基本特征與分類介紹

發(fā)布時間:2018-07-10 閱讀:1108

質粒載體是在天然質粒的基礎上為適應實驗室操作而進行人工構建的質粒。與天然質粒相比,質粒載體通常帶有一個或一個以上的選擇性標記基因(如抗生素抗性基因)和一個人工合成的含有多個限制性內切酶識別位點的多克隆位點序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量盡可能減少,以便于基因工程操作。

 

質粒(plasmid)是細菌或細胞染色質以外的,能復制的,與細菌或細胞共生的遺傳成分。其特點如下:
是染色質外的雙鏈共價閉合環(huán)形DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋結構,不同質粒大小在2-300kb之間,<15kb的小質粒比較容易分離純化,>15kb的大質粒則不易提取。

 


質粒分為嚴緊型和松弛型復制。

根據(jù)質粒DNA復制與宿主之間的關系或在宿主細胞的拷貝數(shù)的多少,可以將質粒分為兩種不同的復制類型:嚴緊型和松弛型。嚴緊型質粒復制受宿主染色體DNA復制的嚴格控制,拷貝數(shù)較小一般只有1~3個拷貝。疏松型質粒的復制宿主的控制比較松,在宿主中的拷貝數(shù)比較多,一般有10~200個拷貝,有時可達到700個。


按基因轉移性:
分兩類:
(1)傳遞性質粒:常為大型、嚴緊型質粒;
(2)非傳遞性質粒:多為小型、松弛型質粒。
按遺傳性狀、產物分類:
(1)抗生素抗性:如氨芐西林、氯霉素抗性;
(2)限制酶-修飾酶(R-M)系統(tǒng):如hsdR-菌株可使DNA甲基化,但不限制外源DNA;hsd-菌株為限制和甲基化雙缺陷型。


人工構建的質粒載體分類:

高拷貝數(shù)的質粒載體:
ColE1、pMB1派生質粒具有高拷貝數(shù)的特點。適合大量增殖克隆基因,或需要大量表達的基因產物。

低拷貝數(shù)的質粒載體:
由 pSC101派生來的載體特點是分子量小的拷貝數(shù)。它有特殊的用途:當有些被克隆的基因的表達產物過多時會嚴重影響寄主菌的正常代謝活動,導致寄主菌的死亡時,就需要低拷貝的載體。

失控的質粒載體
這是一類溫度敏感型復制控制質粒。如pBEU1、 pBEU2。
插入失活型克隆載體。載體的克隆位點位于其某一個選擇性標記基因內部。如pDF41、pDF42。

正選擇的質粒載體
直接選擇轉化后的細胞。只有帶有選擇標記基因的轉化菌細胞才能在選擇培養(yǎng)基上生長。

在線客服

聯(lián)系人:洛辰
QQ:
電話:18321664727
手機:13621980056