人ELISA檢測試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中抗BP180抗體(BP180-Ab)的含量。如血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。今天，我們主要講解人ELISA檢測試劑盒的正確操作步驟：

    1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2、設置標準品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；標準品孔各加不同濃度的標準品50μL。

    3、待測樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL。

    4、隨后標準品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

    6、所有孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

    7、所有孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

    注意事項：人ELISA檢測試劑盒在2-8℃，使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用；實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存；濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，zui終結果乘以5才是樣本實際濃度；嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。所有液體組分使用前充分搖勻。