蛋白質作為生命活動中起重要作用的生物大分子，與一切揭開生命奧秘的重大研究課題都有密切的關系。蛋白質是人類和其他動物的主要食物成分，高蛋白膳食是人民生活水平提高的重要標志之一。以下針對純化蛋白與人血清蛋白分子量不一樣作分析：

客戶問：

用大腸桿菌表達純化的蛋白，和人血清中這種蛋白的分子量不同，western顯示血清中這種蛋白的分子量高于純化的蛋白，請問如何解釋呢？

技術答：

1  可能人血清中的蛋白是被修飾了的，如糖基化以及其他可以影響分子量的修飾。不知道血清中的分子量比你純化的大多少KD？

2  檢查一下蛋白序列中有沒有糖基化位點。大腸桿菌不能糖基化。

3  不知道如何確定是否用糖基化位點呢？血清中分子量比純化的高個2~3kd吧，這是糖基化么？

4  N即Asparagine Asp
X即任意氨基酸
T即Threonine Thr
S即Serine Ser
NXT NXS即在氨基酸一級結構中有Asp-X-Thr或Asp-X-Ser序列則會被糖基化。
查文獻我建議可查其蛋白質性質研究方面的文獻，或以蛋白+糖基化作關鍵詞嘗試查詢。你關注生物活性時可不能忽略糖基化這一點哦，往往糖基化是很多蛋白折疊和實現活性的重要因素。

5  糖基化分三種，N糖基化有特殊識別序列N-X-S/T，O糖基化發生位點迄今尚無明確規律，糖基磷脂酰肌醇錨定一般是定位在細胞膜上，可能血清中的蛋白是沒有的。由于糖基化不是由模板合成，表現出微觀不均一性，因此其分子量是有一定變化。
  一般可預測N糖基化位點，如果存在N-X-S或N-X-T序列，則基本上都是要被糖基化的。zui好能查找一下相關文獻，如果你做的蛋白是已知的，一般都會有文獻報道糖基化分三種，N糖基化有特殊識別序列N-X-S/T，O糖基化發生位點迄今尚無明確規律，糖基磷脂酰肌醇錨定一般是定位在細胞膜上，可能血清中的蛋白是沒有的。由于糖基化不是由模板合成，表現出微觀不均一性，因此其分子量是有一定變化。
  一般可預測N糖基化位點，如果存在N-X-S或N-X-T序列，則基本上都是要被糖基化的。zui好能查找一下相關文獻，如果你做的蛋白是已知的，一般都會有文獻報道。。

溫馨提示：購買“蛋白質試劑”時，請跟我們的銷售核對產品規格、您的地址和，以便我們盡快發貨給您，不耽誤您的實驗。
本公司是生物試劑的供應商之一，專業經銷生命科學領域的知名品牌，產品貨期快、質量品牌保障，更多信息請。