天天色播-欧美综合一区-特黄三级又爽又粗又大-久久a级片-人人干av-av在线日韩-欧美在线不卡视频-人体av-欧美在线二区-免费高清毛片-丰满少妇高潮在线观看-奇米第四色7777-国产肉体ⅹxxx137大胆-男女视频国产-制服 丝袜 激情 欧洲 亚洲-天天操天天舔天天干-中国精品毛片-免费看黄色一级大片-成人涩涩网站-成人试看120秒体验区-亚洲区第一页-生活片av-国产一区99-樱桃国产成人精品视频-国产自在自拍

主營產品: 科研人類ELISA試劑盒說明書,大鼠ELISA試劑盒代測,小鼠ELISA試劑盒廠家
產品分類

公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

公司地址:上海市嘉定區曹安公路5588號

郵政編碼:

公司電話:18321664727

公司傳真:

電子郵件:272967093@qq.com

聯 系 人:洛辰 ( 女士 )

部門(職位):

手機號碼:13621980056

即時通訊:        

技術文章

免疫組化抗原修復注意事項

發布時間:2021-12-07 閱讀:535

經甲醛固定的部分組織細胞,因固定過程中可能會形成醛鍵或羧甲基而封閉部分抗原決定簇,使免疫組化標記敏感性明顯降低,因此在染色前,有些抗原需進行修復或暴露。

抗原修復方法可分為化學方法和物理方法?;瘜W方法是以酶消化方法,常用胰蛋白酶及胃蛋白酶,配制濃度與消化時間要適度。常用的物理方法有單純加熱、微波處理和高壓加熱。在選用這三種方法時,浸泡切片的緩沖液的離子強度和pH、加熱的溫度和時間均影響著抗原修復效果。
1、pH的應用范圍及選擇  

抗原修復液的pH非常重要,有效的抗原修復pH要比修復液的化學成分重要,同樣的修復液隨著pH的升高染色的強度逐漸增強,但佳pH范圍為6.0-10.0。目前大家公認的好的抗原修復液是pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液和pH8.0的EDTA緩沖液。作為通用修復液堿性pH的修復液要比酸性的有效,而對固定很長時間舊的存檔組織,酸性pH的修復液則優于堿性的修復液。
2、抗原修復時應選擇佳溫度  

70-90℃的溫度對未經固定的蛋白質可發生變性,但經福爾馬林固定的蛋白質,溫度必須達到92℃以上方能使其變性。研究結果顯示,溫度為92-98℃是合適的,95℃。
3、抗原修復液必須遵循自然降溫規律,否則效果不好或達不到抗原修復的目的  

抗原修復持續時間過后,取出放于室溫中讓其慢慢地降溫,不能為了爭取時間,強行用冰塊或冷水使其降溫。這是因為當高溫中的抗原蛋白分子鏈脫離了其他的束縛或聯結,要有一個自然環境讓其自然放松下來,隨著溫度的降低,它們會慢慢地恢復原來的形態和構型。
4、盡量使用足量的抗原修復液  

應用于抗原修復的液體,一定要充足,防止切片干涸。應用大量的抗原修復液時,由于它的量較大,可延緩液體的沸騰時間,增加切片受微波輻射的量,對抗原修復將達到徹底

在線客服

聯系人:洛辰
QQ:
電話:18321664727
手機:13621980056