1、ELISA實驗中樣品都要做復孔或三孔，然后計算每個濃度標準品的平均OD值，復孔的變異系數應該小于20%。

2、平均OD值減去空白孔的OD值。

3、制作標準曲線。 以減去本底后的OD值為X軸，標準品的濃度為Y軸，利用作圖軟件得出一個合適的計算方法。建議使用合適的軟件來作圖，比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法（比如直線、半對數、對數、四參數方程等）并從中選擇一條合適的方程。要想檢驗某條曲線是否與表中數據吻合，可以將標準品的濃度作為未知數，將對應的OD值帶入該方程，計算出標準品的濃度，得到的結果應該與實際濃度很接近（+/-10%）。選擇擬合度高的那條曲線。