標簽：辛基-瓊脂糖凝膠4FF 古朵生物 交聯瓊脂糖凝膠 緩沖液

  辛基-瓊脂糖凝膠4FF使用及注意事項!

  產品簡介：

  辛基-瓊脂糖凝膠4FF是將辛基鍵合在瓊脂糖凝膠上形成的一種可利用疏水作用來實現目標產品純化分離的中等疏水類介質。適合各種蛋白的分離和純化。具有流速快，使用方便，應用廣泛的特點。

  產品參數：

  產品名稱：辛基-瓊脂糖凝膠4FF(Octyl-Sepharose4FF)

  基質：6%交聯瓊脂糖凝膠

  配基：正丁烷基n-Octyl

  配基密度：5μmol/mL

  顆粒大小：45-165μm

  大流速：600cm/h

  工作pH：3-13

  操作溫度：室溫

  使用說明：辛基-瓊脂糖凝膠4FF是一種中等疏水層析介質，適合各種蛋白的分離和純化。

  使用方法：

  1.裝柱：

  (1)將所有的試劑和填料達到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。

  (2)根據柱子大小取所需凝膠的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液(按凝膠：緩沖液=3:1比例)配成勻漿。

  (3)將柱內及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液體(液面略高于濾膜)，務必使底端無氣泡。

  (4)用玻璃棒引導勻漿沿著柱內壁一次性倒入柱內，注意不要使用氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內自由沉降，連結好柱子頂端柱頭。

  (5)打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩定。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

  2.平衡：

  讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導和pH不變。平衡緩沖液一般是高鹽濃度的緩沖液，如：0.02-0.05mol/L的PBS加1-2.5mol/L(NH4)2SO4等。

  3.上樣：

  (1)樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心、過濾后上柱;

  (2)一般情況是讓目標產品結合在柱子上，用平衡洗液洗去雜質，再選擇一種洗脫液洗下目標產品。

  (3)介質對樣品組分吸附的程度取決于樣品的疏水性質、流動相的離子強度和溫度。溫度越大、鹽濃度越高或樣品組分疏水性越強，介質對組分吸附越牢。

  4.洗脫：

  疏水介質可用減小鹽濃度進行洗脫。加表面活性劑或者有機溶劑可加強洗脫。常用的洗脫液是低鹽濃度緩沖液，如：0.02-0.05mol/L的PBS。

  5.再生：

  一般用低鹽濃度的緩沖液洗，洗10倍以上柱體積，接著用結合蛋白的平衡液洗到平衡，可再次使用。若有失活的蛋白或者脂類物質在再生時洗不掉，可用在位清洗(CIP)除去。

  6.在位清洗：

  (1)對于以離子鍵結合上去的蛋白，可以用2MNaCl去除。

  (2)對沉淀蛋白、以疏水作用結合的蛋白或者脂類物質，可用1MNaOH去除。

  (3)對強疏水性結合的蛋白、脂類等，可用4-10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產生氣泡。

  (4)清洗完畢后，用至少3倍柱體積緩沖液平衡柱子。

  7.去熱源：

  用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5-6小時或者用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下步驟去除：

  (1)2倍柱體積的70%的乙醇;

  (2)2倍柱體積50MmTris-HcLPh7.5

  (3)1倍柱體積4M尿素

  (4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1MNaCl;

  以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制。

  8.消毒：

  用0.5-1.0MNaOH室溫下洗8-10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

  注意事項：

  (1)密封貯存于4°C-28°C(保存溶液為20%乙醇+0.1M醋酸鈉)，通風、干燥的地方，不能冷凍。用過的柱子貯存于4°C(20%乙醇)。

  (2)在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進入。

  辛基-瓊脂糖凝膠4FF使用及注意事項! 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音譯，寓意是質量好，品牌好，服務好!歡迎新老客戶洽談!古朵生物公司作為其產業中的一分子的使命————為這科研實驗提供材料與服務，為科研領域的發展作出多貢獻。