【古朵生物】ELISA方法的基本用途及操作程序

  1、直接ELISA試劑盒

  本法首要用于檢測抗體。以鴨病毒性肝炎(DVH)抗體的ELISA為例，直接ELISA的操作程序如下：

  (1) 資料

  ① 包被液、洗刷液、保溫液、底物液、停止液;

  ② DVH包被抗原、酶標抗抗體、陰性及陽性DVH參閱血清;待檢鴨血清;

  ③ ELISA檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。

  (2) 方法過程

  ① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢血清 → 37℃ 2小時，洗刷三次、拋干

  ③ 加酶標抗體 → 37℃ 2小時，洗刷三次、拋干

  ④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘，加停止液

  ⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值。

  (3) 成果判定 已知陽性血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1，并且已知陽性血清的OD值≥0.4;在上述條件建立的情況下，如果待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1，并且待檢血清的OD值≥0.4，則判為陽性，不然判為陰性。

  2、雙抗體夾心ELISA試劑盒

  本法首要用于檢測大分子抗原。現以檢測雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的雙夾心抗體ELISA為例介紹本法的操作程序。

  ① 加抗體包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗刷三次、拋干

  ③ 加酶標抗體 → 37℃ 30分鐘，洗刷三次、拋干

  ④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘，加停止液

  ⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。

  3、雙夾心ELISA試劑盒

  此法與雙抗體夾心ELISA的首要差異在于：它是采用酶標抗抗體查看多種大分子抗原，它不只不用符號每一種抗體，還可進步試驗的敏感性。

  此法的根本程序為：

  ① 加抗體(Ab-1)包被 → 4℃過夜，洗刷三次、拋干

  ② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ③ 加用非同種動物出產的特異性抗體(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ④ 加入酶標抗Ab-2抗體(AB-3)→ 37℃ 60分鐘，洗刷三次、拋干

  ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加停止液

  ⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。