ELISA實驗要點：ELISA實驗中緩沖溶液等試劑的配置

  ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎，ELISA試劑以及各種溶液如何配置?近剛做了下ELISA實驗，古朵生物技術小編把各種ELISA配置方法匯總如下：

  1、ELISA實驗包被緩沖液

  2、ELISA實驗洗滌緩沖液

  3、ELISA實驗稀釋液

  4、ELISA實驗終止液

  5、ELISA底物緩沖液

  6、ELISA實驗TMB四甲基聯(lián)苯胺、使用液

  7、ELISA實驗ABTS使用液

  8、ELISC

  試劑

  1、ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液)：

  NaHCO31.59g

  NaHCO32.93g

  加蒸餾水至1000ml

  2、ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS)：0.15M

  KH2PO4 0.2g

  Na2HPO4·12H2O2.9g

  NaCl 8g

  KCl0.2g

  Tween-20 0.05%0.5ml

  加蒸餾水至1000ml

  3、ELISA實驗稀釋液：

  牛血清白蛋白(BSA) 0.1g

  加洗滌緩沖液至100ml

  或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5～10%使用。

  4、ELISA實驗終止液(2M H2SO4)：

  蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸98%、21.7ml。

  5、ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸)：

  0.2M Na2HPO4(28.4g/L) 25.7ml

  0.1M 檸檬酸(19.2g/L)24.3ml

  加蒸餾水50ml

  6、ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液：

  TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml

  底物緩沖液(PH5.5)10ml

  0.75%H2O2 32μl

  7、ELISA實驗ABTS使用液：

  ABTS0.5mg

  底物緩沖液(PH5.5)1ml

  3%H2O22μl

  8、ELISA實驗封閉液：

  牛血清白蛋白(BSA) 5g

  加洗滌緩沖液至100ml

  值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉，不適合長期保存。

  為了保證ELISA實驗的準確性，實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要，將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔，嚴防交叉污染。

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