課堂小知識:ELISA實驗必須要注意的事項
課堂小知識:ELISA實驗必須要注意的事項
Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
在ELISA實驗操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的,無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術(shù)要求,都是如此。下面所提到的就是一些在進(jìn)行ELISA實驗時所要注意15個問題。
1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、溫浴時,要用封板膜封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
9、洗板時,每次洗液加入后,應(yīng)靜置1-2分鐘,使清洗加徹底。沒有洗板機(jī)時,倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
10、檢測前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
11、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
12、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。
13、溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
14、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
15、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。


