古朵生物：elisa過(guò)程中有哪些注意事項(xiàng)

  ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

  1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%.可用水和電子天平進(jìn)行確定.希望有好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正.

  2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支.吸取不同的液體后,要換槍頭.即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí).

  3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果穩(wěn)定.

  4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存.

  5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確.

  6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差.

  7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去.

  8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體.也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能.

  9、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā).

  10、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗加徹底.沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干.

  11、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液.加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存.

  12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配.

  13、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上.

  14、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸.

  15、待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果.

  16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定.

  17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性.

  18、對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證.

  二、下面所提到的是針對(duì)我公司的ELISA產(chǎn)品會(huì)出現(xiàn)的問(wèn)題及解決辦法

  1.加入反應(yīng)終止液后,沒(méi)有吸光值或吸光值偏低.

  a.原因：未加入酶標(biāo)記物.

  解決辦法：請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行.

  b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回.

  解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作.

  c.原因：室溫太低.

  解決辦法：若室溫太低(25℃).

  解決辦法：若無(wú)法降低室內(nèi)溫度,請(qǐng)適當(dāng)縮短步驟4的溫育時(shí)間.

  b.原因：底物溶液受到污染.

  解決辦法：若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍(lán)色,請(qǐng)不要再使用.

  c.原因：反應(yīng)時(shí)間超過(guò)太久.

  解決辦法：請(qǐng)控制反應(yīng)時(shí)間.

  d.原因：酶標(biāo)記物污染了盒內(nèi)其它試劑.

  解決辦法：使用過(guò)的吸頭應(yīng)立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標(biāo)記物與底物溶液)接觸過(guò)的容器應(yīng)立即清洗干凈.(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無(wú)殘留)

  4.陰性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值低于陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值.

  a.原因：微孔中的試劑未能充分混合.

  解決辦法：試劑加完后,需輕敲盤四周使其充分混合均勻.

  b.原因：洗板過(guò)程發(fā)生問(wèn)題(同2-f.).

  解決辦法：請(qǐng)參考2-f.

  c.原因：添加樣品或酶標(biāo)記物的量不一致.

  解決辦法：請(qǐng)參考2-d.

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。