對于Elisa試劑盒的原理及相關(guān)檢測方法您了解多少?

  elisa試劑盒介紹

  ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來，得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇，在歐美及中國獲得很大的推廣，尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。 Elisa生物試驗是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

  elisa試劑盒原理

  酶聯(lián)免疫吸附測定(enzyme linked immunosorbent assay，簡寫ELISA)指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到?>聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結(jié)合進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測方法。

  分類方法

  夾心法

  夾心法常用于檢測大分子抗原，一般的操作步驟為：

  將具有專一性的抗體固著(coating)于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體;

  加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);

  洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原專一的一次抗體，與待測抗原進(jìn)行鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。

  間接法

  間接法常用于檢測抗體，一般的操作步驟為：

  將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原;

  加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié);

  洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測的一次抗體鍵結(jié);

  洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器(ELISA reader)測定塑膠盤中的吸光值(OD值)，以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。

  競爭法

  競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機(jī)制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：

  將具有專一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體;

  加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié);

  加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié)，即所謂競爭法之由來;

  洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。