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古朵闡述:如何制備多克隆抗體有哪些關鍵技術點

發布時間:2023-11-10 閱讀:268

  如何制備多克隆抗體有哪些關鍵技術點


  抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monoclonal Antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一種抗原決定簇,也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。抗原刺激機體,產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。

  一、組織結構

  抗原上那部分可以引起機體產生抗體的分子結構,叫做抗原決定簇。一個抗原上可以有好幾個不同的抗原決定簇,因而使機體產生好幾種不同的抗體,終產生出抗體是漿細胞。只針對一個抗原決定簇起作用的漿細胞群就是一個純系,純系的英文為Clone,音譯就是克隆。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。單克隆抗體能目標明確地與單一的特異抗原決定簇結合,就象地命中目標一樣。另一方面,即使是同一種抗原決定簇,在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體,形成好幾種單克隆抗體混雜物,稱為多克隆抗體。

  二、抗體分類

  抗原通常是由多個抗原決定簇組成的,由一種抗原決定簇刺激機體,由一個B淋巴細胞接受該抗原所產生的抗體稱之為單克隆抗體(Monoclone antibody)。由多種抗原決定簇刺激機體,相應地就產生各種各樣的單克隆抗體,這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體,機體內所產生的抗體就是多克隆抗體;除了抗原決定簇的多樣性以外,同樣一類抗原決定簇,也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯物)刺激機體產生免疫反應,有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。多克隆抗體由于其可識別多個抗原表位、可引起沉淀反應,制備時間短,成本低的原因廣泛應用于研究和診斷方面。

  三、抗原準備

  可以作為抗原的物質有很多種,一般的科研實驗中,經常使用的抗原有:偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。

  對可溶性抗原而言,為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。

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