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大鼠ELISA試劑盒試驗操作中不容忽視的關鍵點,您都知道嗎?

發(fā)布時間:2019-03-05 閱讀:1093

大鼠ELISA試劑盒試驗操作中,許多童鞋都經(jīng)歷過做了很多次ELISA,卻還是得不出好結(jié)果。其實實驗方法雖然成熟,但是操作的時候一不留神,結(jié)果就可能毀于一旦。看看你有沒有忽略過以下這些關鍵點?

1、在細胞收集、總蛋白提取整個操作都要盡量在冰上進行。提前開離心機預冷。

2、電泳用自來水沖洗干凈后,要再用蒸餾水沖洗,晾干。

3、灌膠前玻板一定要對齊夾緊。曾有過整個下午都在漏膠花膠的慘痛經(jīng)歷。

4、轉(zhuǎn)膜前,膜事先用甲醇激活,轉(zhuǎn)膜時zui好把轉(zhuǎn)膜槽放置在冰浴中進行轉(zhuǎn)膜。

5、孵育的時候不要好幾張膜疊在一起摩擦摩擦,這對結(jié)果也會有影響。

6、用膠片曝光的時候一定要快進快出,膠片可事先折個小角。膠片容易刮花,接觸的時候要特別小心,萬一劃傷了目標條帶真是心痛到說不出話。

7、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但zui好有專業(yè)人員進行矯正。

8、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。

9、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。

10、實驗時,要使底物避光保存。

11、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。

大鼠ELISA試劑盒試驗操作中所要求的條件是比較嚴格的,無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術(shù)要求,都是如此。上面所提到的就是一些在進行ELISA實驗時不容忽視的關鍵點。

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