適應在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細胞稱為傳代細胞。幼年動物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細胞較易培養(yǎng)，而神經(jīng)細胞則較難培養(yǎng)。原代細胞基礎上通過胰酶等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細胞培養(yǎng)的細胞，它與原代細胞具有相同核型。這類細胞在體外可以無限制分裂.下面小編就講一下細胞傳代的方法以及步驟:

1.【無菌環(huán)境】

在細胞實驗之前要注意無菌環(huán)境的建立，紫外殺毒滅菌，酒精消毒都是十分有必要的。

2.【鏡下檢查】

鏡下檢查結(jié)果非常重要，鏡檢的結(jié)果非常重要，要根據(jù)你自己的觀察進行細胞密度的識別，從而進行細胞傳代比例的確定，進行好的細胞數(shù)量的控制，如果實驗要求比較高，需要細胞計數(shù)板計數(shù)。

3.【過火焰】

記住，所有開瓶的東西都要進行過酒精燈外焰，瞬間高溫進行灰塵的固定。這樣會大大減少染菌幾率。

4.【移液工具】

很多人對于移液工具都有偏好，不好說什么就是正確的。但是從無菌角度。使用移液管比微量移液槍減少污染的幾率要高。希望大家能用移液管。

5.【交叉污染】

混勻細胞懸液和移取培養(yǎng)基以及血清的工具要分開；還有就是胰酶和血清也要嚴格分開，否則容易造成交叉感染，使細胞增加染菌幾率。

6.【消化時間】

對于貼壁細胞，我想要大家注意的是胰酶消化時間，對于常用0.25%的胰酶好把消化時間控制在30s內(nèi)，必要是好鏡檢看一下是否脫壁。但是這是一個經(jīng)驗活，要多積累經(jīng)驗。

7.【細胞混勻】

細胞的混勻要輕柔，氣泡的產(chǎn)生對細胞的狀態(tài)是有影響的，希望大家注意。另外，貼壁細胞容易粘連，所以要多吹打幾次。