古朵ELISA試劑盒夾心法和間接法操作方法介紹:

  用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

  1、包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

  2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

  3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

  4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

  5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

  6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA試劑盒檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

  用于檢測未知抗體的間接法：

  用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

  ELISA試劑盒夾心法和間接法上海古朵生物科技有限公司，由具有資深行業背景和豐富市場經驗的專業人士組成，致力于為生命科學研究領域提供優質產品，為廣大科研工作者提供服務。 既能滿足研發類客戶對產品種類、包裝、純度的特殊要求，也能滿足生產型企業從小試、中試到規模化生產各個階段的綜合需求。產品涵蓋有機試劑、無機試劑和生 化試劑，標準物質、天然植物提取物及中藥標準品，核酸、酶、緩沖劑、顯色底物，醫藥中間體、原料藥、催化劑、高純溶劑、特種高分子材料及實驗室常用耗材。