蛋白質與國產ELISA試劑盒相互作用的研究

  古朵生物 國產ELISA試劑盒與蛋白質是生命活動的執行者，細胞內的生理變化都是通過蛋白質來實現的。但是生命活動中各項功能和行為不是由單一的蛋白質來完成的，需要蛋白質與蛋白質，蛋白質與核酸之間的相互作用來實現的。蛋白-蛋白互作網絡與轉錄調控網絡對調控細胞及其信號有重要意義。于是對于蛋白之間相互作用的研究也變的很重要，關于研究方法也是層出不窮。

  在我們實驗研究的過程中主要用到以下幾種技術：

  1.酵母雙雜交(Y2H)

  2.Pull-down技術

  3.免疫共沉淀技術(Co-IP)

  4.亞細胞共定位技術

  5.噬菌體展示技術(PDT)

  6.熒光共振能量轉移技術(FRET)

  7.雙分子熒光互補技術(BIFC)

  其中實驗室比較常用的研究方法主要是前三種。這里對酵母雙雜交技術略作介紹和評述。

  原理：

  酵母雙雜交系統由Fields和Song等首先在研究真核基因轉錄調控中建立的。酵母的半乳糖苷酶基因的轉錄激活因子GL4有兩個的結構域 ：N末端的DNA結合域(BD)和C末端的轉錄激活域(AD)。BD與DNA分子結合，AD激活下游基因的轉錄，國產ELISA試劑盒只有兩者在空間上充分接近才能激活下游基因的轉錄。于是將要研究的兩個蛋白分別與BD和AD融合，如果兩個蛋白有相互作用則AD和BD在空間上會接近進而激活下游報告基因的轉錄。

  操作步驟：

  (1)首先構建已知蛋白的cDNA序列為誘餌，與DNA結合域融合(2)將待篩選的蛋白的cDNA序列與轉錄激活域融合，構建成文庫質粒(3)將這兩個質粒共轉化到酵母細胞中(4)通過檢測下游報告基因的表達篩選或確認蛋白相互作用。

  優缺點：

  優點：是可以在文庫中可以高通量篩選與目的蛋白相互作用的蛋白缺點：是假陽性多，還需要其他方法相互印證，國產ELISA試劑盒不適用于所有的蛋白

  國產ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量"的方針。