古朵闡述：ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題解析

  設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí)，是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋，再分別加到板上的兩個(gè)孔，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔?前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了，但做出來(lái)的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法?

  為了減小誤差，是先稀釋再加樣。而針對(duì)這位客戶所遇到的疑問(wèn)，我公司技術(shù)人員是這樣解說(shuō)的：

  1. 前者測(cè)的是稀釋和移液的誤差，后者只有移液誤差。

  2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。

  3. 由于是從同一原液稀釋，一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的)，都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔(而不是一一稀釋，這樣可以使稀釋誤差減小)。

  4. 復(fù)孔是為了排除移液體積，板的影響，以及其他系統(tǒng)誤差的，要求復(fù)孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求，一一稀釋不能。

  ELISA操作技巧：

  1.操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18 C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的次數(shù)等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。

  2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑，避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺，血清殘留在反應(yīng)孔壁上，加樣器吸頭要清洗干凈，避免污染，加樣次序要與說(shuō)明書(shū)一致，否則可導(dǎo)致結(jié)果錯(cuò)誤，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差。

  3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗滌次數(shù)不要超過(guò)說(shuō)明書(shū)推薦的洗滌次數(shù)，洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時(shí)間不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流，造成孔問(wèn)污染，導(dǎo)致假陰性或假陽(yáng)性。

  4.要保證加液量一致 我們?cè)谑褂脮r(shí)感覺(jué)滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn)，造成顯色不統(tǒng)一，判斷錯(cuò)誤。

  5.顯色液量不可過(guò)多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強(qiáng)。

  ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針。