古朵新聞：ELISA實(shí)驗(yàn)之洗滌要點(diǎn)

  古朵生物總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)，希望能對(duì)大家的實(shí)驗(yàn)有所幫助：

  洗滌在ELISA過程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗，ELSIA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)討星中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)，聚苯乙燒等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)巴這種非持異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來?？梢哉f在ELISA提作中，洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起提作者的高度重視，不得馬虎。

  洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外，手工提作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下:

  1.浸泡式

  D吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液

  0用洗滌液過過洗一遍:3浸泡，即將洗滌液注滿板孔，放置1~ 2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短:9吸干孔內(nèi)液體，吸干應(yīng)徹底，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾上拍干5重復(fù)提作0和9，洗滌3~4次。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時(shí)間.

  2.流水沖洗式流水沖洗法初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸水甚至可用自來水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸水浸泡2分鐘，吸干即可，浸泡式猶如盤浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果為徹底，目也簡便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用干微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果佳。

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