ELISA實(shí)驗(yàn)丨古朵生物教您如何選擇試劑盒

  ELISA產(chǎn)品選擇要素

  根據(jù)實(shí)驗(yàn)物種及待檢樣品性質(zhì)來(lái)選擇

  種屬：人、小鼠、大鼠、雞、牛、猴等;

  樣本類(lèi)型：血清、血漿、組織培養(yǎng)上清、組織或細(xì)胞裂解物。

  根據(jù)樣品中檢測(cè)物水平選擇

  寬動(dòng)力學(xué)檢測(cè)范圍：對(duì)樣品種待測(cè)物水平?jīng)]有任何參考數(shù)據(jù);

  高靈敏度試劑盒：待檢物含量很低。

  根據(jù)樣本可獲得性來(lái)選擇

  通常商品化試劑盒的樣品用量在50μL或100μL，也有部分用量可以少至20μL。

  供應(yīng)商資質(zhì)評(píng)估

  同行口碑

  文獻(xiàn)引用

  品牌歷史

  試劑盒關(guān)鍵技術(shù)參數(shù)

  加標(biāo)回收率

  度

  靈敏度等

  傳說(shuō)中的八大質(zhì)控指標(biāo)

  規(guī)范嚴(yán)格的ELISA廠商會(huì)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)控，聯(lián)科生物每個(gè)指標(biāo)的ELISA產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)都會(huì)標(biāo)注八大質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)。一起來(lái)了解下這些指標(biāo)的含義~

  回收率

  將已知的低、中、高濃度的重組蛋白摻入到待測(cè)樣本中，摻入前后測(cè)到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，以此驗(yàn)證檢測(cè)的準(zhǔn)確度。復(fù)雜的樣本基質(zhì)，如血清、血漿中可能含有干擾因子，影響準(zhǔn)確定量目標(biāo)分析物。的ELISA試劑盒回收率通常在80-120%之間(視為無(wú)可計(jì)量的基質(zhì)干擾)，合格試劑盒在60%左右。

  稀釋線性

  樣本稀釋后，終分析物濃度應(yīng)該相同，這個(gè)就是公認(rèn)的實(shí)驗(yàn)線性。干擾因子會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的線性，除非在研發(fā)環(huán)節(jié)克服這些干擾效應(yīng)。我們?yōu)槊總€(gè)驗(yàn)證過(guò)的樣本類(lèi)型用試劑自帶的稀釋液進(jìn)行系列稀釋。結(jié)果用檢測(cè)值和理論值的百分比表示，線性介于80-120%為理想結(jié)果。

  度

  在相同條件下，對(duì)被測(cè)量物(高、中、低濃度)進(jìn)行多次反復(fù)測(cè)量，測(cè)得值之間的一致(符合)程度。這一特性具有重要意義：

  保證一項(xiàng)試驗(yàn)中得到的結(jié)果是準(zhǔn)確的，并且一次實(shí)驗(yàn)到下一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果可重復(fù);

  判定兩個(gè)結(jié)果相同還是不同。

  通常用變異系數(shù)(coefficient of variation, CV)來(lái)表示。ELISA試劑盒的酶標(biāo)板內(nèi)變異系數(shù)(CV)小于5%，酶標(biāo)板間變異系數(shù)小于8%。

  校準(zhǔn)

  每個(gè)試劑盒包含的標(biāo)準(zhǔn)品都經(jīng)過(guò)高純度蛋白的校準(zhǔn)。聯(lián)科生物標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量是通過(guò)與母校準(zhǔn)品進(jìn)行比較而制定。用于保證不同批次間試劑盒的一致性，所有批次的試劑盒均經(jīng)過(guò)母校準(zhǔn)品校對(duì)，不會(huì)出現(xiàn)結(jié)果偏差。

  特異性

  抗體是特異的,只與相應(yīng)抗原反應(yīng)。實(shí)際制備的抗體卻常有非特異性反應(yīng)，這是因?yàn)榭乖患冊(cè)斐傻摹６嘟M分抗原之間存在共同的抗原決定簇，或者兩個(gè)抗原決定簇結(jié)構(gòu)類(lèi)似能與同一抗體結(jié)合，均可出現(xiàn)抗體與異源抗原的交叉反應(yīng)。

  ELISA試劑盒包含哪些組分

  以雙抗夾心法中的二步法ELISA試劑盒為例，ELISA試劑盒一般包含說(shuō)明書(shū)，封板膜，預(yù)包被的酶標(biāo)板，標(biāo)準(zhǔn)品，生物素被標(biāo)記的檢測(cè)抗體，鏈霉親和素標(biāo)記的HRP,顯色液，終止液，檢測(cè)緩沖液，標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，洗液等十個(gè)組分。

  ELISA上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。