上海古朵生物專業經營進口/國產ELISA試劑盒，詳細為您介紹人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒的性點，用途，價格，規格，操作說明書，操作步驟等詳情，本司長期現貨供應動物血清，培養基，抗體，化學試劑，生化試劑，標準品，染色液，酶聯免疫試劑盒，白介素試劑盒，金標檢測試劑盒，為客戶提供代測ELISA試劑盒服務，所銷售的ELISA試劑盒種屬涵蓋了大鼠，小鼠，人，豚鼠，植物，馬，鴨，雞，兔，豬，狗及其他動物，歡迎來電咨詢更多ELISA試劑盒種屬!

  中文名：人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒

  別名：人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA Kit

  供應商：上海古朵

  規格：48t/96t

  保存：2-8℃

  有效期：6個月

  產品特異性：本試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

  產品實驗設備：酶標儀， 37℃恒溫箱，自動洗板機，可調節移液器以及其吸頭，蒸餾水，干凈的試管，容量瓶等。

  產品應用領域：本ELISA試劑盒限科研，嚴禁臨床使用。

  特點：靈敏性高、特異性強、重復性好。

  檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測試劑盒細胞裂解液裂解細胞之前，必須根據以下方向的測定。

  1.貼壁細胞應分離胰蛋白酶和離心后收集(懸浮細胞將離心收集直接)。

  2.洗細胞三次冷PBS。

  3.懸浮細胞在PBS(1×)和細胞受超聲處理4次(或≤冷凍細胞-20°C。用溫和的混融細胞。3次重復凍結/解凍周期。)

  4.在1500×g離心10分鐘在2到8攝氏度去除細胞碎片。

  5.細胞培養上清和其他生物液體在1000×g離心20分鐘去除樣品顆粒和即刻檢測或者商店樣品在-20°C或稀釋后使用80oC。避免重復凍結/解凍循環。

人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測試劑盒液體類標本：

  包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

  1)血清：

  室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

  2)血漿：

  應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

  3)尿液：

  用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

  4)細胞培養上清：

  檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并 放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

  5)組織標本：

  切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒問題解析：

  1.試劑的選擇：選擇優良試劑大家都是知道的，但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。

  2.加樣中可能遇到的問題：在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候，會碰到血清血漿不好分離的情況，這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時，然后在進行離心處理

  3.洗板時容易造成誤差： 因為洗板是人工洗的，所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的，這個時候帶有主觀色彩，所以多清洗幾次，還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動

 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒操作步驟：

  1. 每孔分別加入已稀釋的樣品、標準品各100ul。

  2. 將板置于37℃溫育30分鐘。

  3. 甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。

  4. 每孔加入酶標偶合液100ul。

  5. 將板置于37℃溫育30分鐘。

  6. 甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。

  7. 每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應15分鐘。

  8.每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。

人αN已酰氨基葡糖苷酶（αNAG）ELISA試劑盒注意事項：

  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

  2.濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

  3.各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

  4.請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

  5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

  6.底物請避光保存。

  7.嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

  8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9.本試劑不同批號組分不得混用。

  10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

  人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA檢測試劑盒組織結構：

  1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心23分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。

  2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。

  3、 細胞上清液：1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。

  4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘，取上清液。

  5、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。