兔子骨膠原交聯(Cr)ELISA檢測試劑盒的若干特點：

專一性強：抗原與抗體的免疫反應是專一反應，而免疫酶技術以免疫反應為基礎，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。

靈敏度高：由于抗體聯結上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應，顯示抗原與抗體的結合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。

樣品易保存：經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定，因此有利于樣品的保存。


檢測原理：
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被樣本抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹 底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

兔子骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒（大鼠,小鼠,人）組成：
1、包被抗-HBs反應條 1瓶
2、酶結合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4、HBsAg陰性對照 1瓶
5、洗滌液：用前每瓶作1：20稀釋 1瓶
6、顯色劑（TMB）A 1瓶
7、顯色劑（TMB）B 1瓶
8、終止液 1瓶

骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒操作方法：
1、加入待測標本每孔0.05ml，并設HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照1孔，然后加入酶結合物每孔1滴（0.05ml、空白對照孔不加），充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板：棄去反應條孔內液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復五次后拍干。
3、顯色劑：先加顯色劑A每孔1滴（0.05ml），然后再加顯色劑B每孔1滴（0.05ml），混勻，37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴（0.05ml），混勻。

結果：
比色法：波長450nm，先用空白孔校零點，然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性，否則為陰性。
備注：陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算，高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8，實驗結果有效。


兔子骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒（大鼠,小鼠,人）注意事項：
1．  試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．  濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．  各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．  請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．  底物請避光保存。
7．  嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．  所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．  本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

骨膠原交聯(Cr)ELISA試劑盒組織結構：
1、 血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心35分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心60分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液：1000×g離心32分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心33分鐘，取上清液。
5、 保存：如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。